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抑菌圈分析儀的試驗(yàn)中如何避免抑菌圈產(chǎn)生不正常形狀
更新時(shí)間:2018-12-08 點(diǎn)擊次數(shù):3185次
抑菌圈作為一種福萊明發(fā)現(xiàn)青霉素的過(guò)程中形成的一個(gè)詞匯,通過(guò)抑菌圈法可以作為一種衡量殺菌劑效果的方法。而抑菌圈分析儀被廣泛適用于生產(chǎn)、檢測(cè)與研究抗生素藥物的藥廠、藥檢所、醫(yī)院以及相關(guān)的院校與研究所。但是在試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn),抑菌圈有可能出現(xiàn)破裂或呈卵圓形、橢圓形等不正常形狀時(shí),可以從以下幾個(gè)方面進(jìn)行分析和調(diào)整:
1.鋼管兩端面不夠平,使抗生素漏出,破壞了均勻擴(kuò)散現(xiàn)象。雙碟底面不平或制備瓊脂培養(yǎng)基平板時(shí)工作臺(tái)不水平,可造成基層厚度不均勻,因此應(yīng)選擇加工相同的鋼管,兩端面不同的切勿混用;挑選底平的雙碟,調(diào)整工作臺(tái)的水平。
2.玻璃雙碟、鋼管、鋼管放置器等被抗生素液污染,會(huì)使抑菌圈破裂,有時(shí)甚至使試驗(yàn)菌被抑制,因此,在整個(gè)試驗(yàn)中要嚴(yán)格防止抗生素污染。
3.在制備瓊脂培養(yǎng)基菌層時(shí),培養(yǎng)基溫度過(guò)高或受熱時(shí)間過(guò)長(zhǎng),可造成試驗(yàn)菌部分被殺死或全部被殺死,使抑菌圈破裂甚至無(wú)菌??刂品椒ㄊ歉鶕?jù)菌種要求不同,將培養(yǎng)基均勻降溫,溫度平衡后,再加入試驗(yàn)菌。
4.在滴加抗生素溶液至鋼管內(nèi)時(shí),毛細(xì)滴管口易濺出溶液滴在瓊脂培養(yǎng)基表面,不易覺(jué)察,影響抑菌圈,因此滴加溶液時(shí)毛細(xì)滴管內(nèi)不得有氣泡,避免管口太細(xì),毛細(xì)滴管距離鋼管口不應(yīng)太高。
5.瓊脂培養(yǎng)基上鋼管間隔距離太小而抑菌圈較大時(shí),會(huì)形成互相影響的卵圓形或橢圓形的抑菌圈。調(diào)整抑菌圈的直徑可解決此問(wèn)題。如:增加菌層培養(yǎng)基內(nèi)的試驗(yàn)菌量;降低抗生素溶液的濃度;調(diào)整稀釋抗生素用的緩沖液的PH值或鹽濃度;調(diào)整培養(yǎng)基的配方。
6.雙碟培養(yǎng)過(guò)程中,溫度不均勻,雙碟上細(xì)菌生長(zhǎng)速度不一致,造成抑菌圈小或不圓,影響抗生素在瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)的擴(kuò)散系數(shù)。因此在細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)使用水浴恒溫培養(yǎng)箱,保證受熱均勻。
1.鋼管兩端面不夠平,使抗生素漏出,破壞了均勻擴(kuò)散現(xiàn)象。雙碟底面不平或制備瓊脂培養(yǎng)基平板時(shí)工作臺(tái)不水平,可造成基層厚度不均勻,因此應(yīng)選擇加工相同的鋼管,兩端面不同的切勿混用;挑選底平的雙碟,調(diào)整工作臺(tái)的水平。
2.玻璃雙碟、鋼管、鋼管放置器等被抗生素液污染,會(huì)使抑菌圈破裂,有時(shí)甚至使試驗(yàn)菌被抑制,因此,在整個(gè)試驗(yàn)中要嚴(yán)格防止抗生素污染。
3.在制備瓊脂培養(yǎng)基菌層時(shí),培養(yǎng)基溫度過(guò)高或受熱時(shí)間過(guò)長(zhǎng),可造成試驗(yàn)菌部分被殺死或全部被殺死,使抑菌圈破裂甚至無(wú)菌??刂品椒ㄊ歉鶕?jù)菌種要求不同,將培養(yǎng)基均勻降溫,溫度平衡后,再加入試驗(yàn)菌。
4.在滴加抗生素溶液至鋼管內(nèi)時(shí),毛細(xì)滴管口易濺出溶液滴在瓊脂培養(yǎng)基表面,不易覺(jué)察,影響抑菌圈,因此滴加溶液時(shí)毛細(xì)滴管內(nèi)不得有氣泡,避免管口太細(xì),毛細(xì)滴管距離鋼管口不應(yīng)太高。
5.瓊脂培養(yǎng)基上鋼管間隔距離太小而抑菌圈較大時(shí),會(huì)形成互相影響的卵圓形或橢圓形的抑菌圈。調(diào)整抑菌圈的直徑可解決此問(wèn)題。如:增加菌層培養(yǎng)基內(nèi)的試驗(yàn)菌量;降低抗生素溶液的濃度;調(diào)整稀釋抗生素用的緩沖液的PH值或鹽濃度;調(diào)整培養(yǎng)基的配方。
6.雙碟培養(yǎng)過(guò)程中,溫度不均勻,雙碟上細(xì)菌生長(zhǎng)速度不一致,造成抑菌圈小或不圓,影響抗生素在瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)的擴(kuò)散系數(shù)。因此在細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)使用水浴恒溫培養(yǎng)箱,保證受熱均勻。