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紅細胞微核計數(shù)的正確操作和注意事項
更新時間:2024-04-15 點擊次數(shù):3049次
紅細胞微核計數(shù)系統(tǒng)專為遺傳毒理大數(shù)據(jù)設(shè)計,適用Giemsa染色的哺乳動物骨髓或外周血紅細胞微核試驗。通過對嗜多染紅細胞(PCE)的智能學(xué)習(xí),采用隨機共振技術(shù),幾十秒即可從上百張混有各類細胞的顯微影像中抓取2000個PCE細胞并識別微核,自動計算含微核細胞率。
紅細胞微核計數(shù)操作和注意事項
1.清潔:應(yīng)保證計數(shù)板和蓋玻片清潔。操作時,勿接觸計數(shù)板表面,以防污染。使用后,依次用95%乙醇、蒸餾水棉球、清潔綢布擦凈。
2.充池:需一次完成充池,如充池過少、過多或有氣泡、繼續(xù)充液,應(yīng)重新操作,充池后不能移動蓋玻片。紅細胞在計數(shù)池中若分布不均,每個中方格間相差超過20個應(yīng)重新充池,兩次紅細胞計數(shù)相差不得超過5%.
3.計數(shù)板:改良牛鮑計數(shù)板每年要鑒定1次,以免影響計數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
4.白細胞影響:通常白細胞總數(shù)較少,僅相當(dāng)于紅細胞的1/500~1/1000,對結(jié)果影響很小,可以忽略不計。但白細胞過高者(WBC>100×109/L),紅細胞計數(shù)結(jié)果應(yīng)進行校正。方法有兩種:一是直接將患者紅細胞數(shù)減去白細胞數(shù),二是在高倍鏡下觀察勿將白細胞計入,白細胞體積常比紅細胞略大,中央無凹陷,細胞核隱約可見,無黃綠色折光。
5.紅細胞稀釋液:傳統(tǒng)稀釋液(Hayem液)由NaCl(氯化鈉,調(diào)節(jié)滲透壓)、Na2S04.10H2O(結(jié)晶硫酸鈉,提高比密防止細胞粘連)、HgCl2.和蒸餾水組成。枸櫞酸鈉稀釋液由枸櫞酸鈉(抗凝和維持滲透壓)、甲醛(防腐和固定紅細胞)、氯化鈉(調(diào)節(jié)滲透壓)和蒸餾水組成。普通生理鹽水或加1%甲醛生理鹽水。
紅細胞微核計數(shù)微核試驗是檢測染色體或有絲分裂器損傷的一種遺傳毒性試驗方法。無著絲粒的染色體片段或因紡錘體受損而丟失的整個染色體,在細胞分裂后期仍留在子細胞的胞質(zhì)內(nèi)成為微核。較常用的是嚙齒類動物骨髓嗜多染紅細胞(PCE)微核試驗。以受試物處理嚙齒類動物,然后處死,取骨髓,制片、固定、染色,于顯微鏡下計數(shù)PCE中的微核。